文章目录

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.2 仪器与设备

1.3 方法

    1.3.1 一次薏苡仁水酶法蛋白肽的制备

    1.3.1 二次酶解薏苡仁蛋白制备抗氧化功能提升肽的工艺流程

    1.3.2 蛋白质回收率（PR）测定方法

    1.3.3 水解度（DH）测定方法

    1.3.4 样品蛋白水解液的-NH2含量

    1.3.5 抗氧化性测定方法

        1.3.5. 1 DPPH自由基清除能力

        1.3.5. 2 ABTS自由基清除能力

        1.3.5. 3 Fe2+螯合能力

        1.3.5. 4·OH清除能力

    1.3.6 数据分析

2 结果分析

2.1 二次酶解薏苡仁蛋白肽的水解度和蛋白质回收率变化

2.2 二次酶解薏苡仁蛋白肽提升抗氧化性能结果分析

    2.2.1 DPPH自由基清除能力

    2.2.2 ABTS自由基清除活性

    2.2.3·OH清除能力

    2.2.4 Fe2+螯合能力

2.3 多元统计分析

    2.3.1 基于热图分析对二次酶解的监控和条件筛选

    2.3.2 基于PCA对二次酶解的监控和条件筛选

    2.3.3 基于差异条形图对二次酶解的监控和条件筛选

3 结论

文章摘要:采用相对丰度热图、主成分分析法、差异条形图等多元统计分析法对风味蛋白酶（Flavourzyme）、复合蛋白酶（Protamex）和两者复合酶二次酶解薏苡仁蛋白6 h的水解物其6个指标(水解度、蛋白质回收率和DPPH、ABTS、Fe²⁺螯合能力以及·OH清除能力4个抗氧化指标)进行研究,旨在构建一种高效快速筛选薏苡仁抗氧化提升肽最佳酶解条件的方法。6个理化指标变化趋势显示风味蛋白酶处理1 h（Flavourzyme 1 h,F-1）与复合蛋白酶处理3 h（Protamex 3 h,P-3）二次酶解薏苡仁蛋白提升肽的综合表现较明显优势,但两者差异不显著;相对丰度热图显著性特征显示F-1和P-3的处理条件显著提升酶解程度和抗氧化特性;主成分分析显示F-1与六个指标的相关性比较强,显著性高,在第一主成分的占比高于P-3;误差线差异条形图显示F-1的抗氧化特性指标和酶解程度指标的平均含量最大,且其p值为0.087,差异显著性最高,从而确定F-1的酶解条件为最优酶解条件。对采用相对丰度热图、主成分分析法和差异条形图结合的多元统计学方法对二次酶解薏苡仁蛋白筛选抗氧化提升肽过程的监测和筛选进行了研究,为在食品中高效筛选目标产物提供新的方法策略。

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